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雙縮脲反應(yīng)的原理是尿素加熱形成氨氣和雙縮脲，在呈堿性條件下，銅離子與雙縮脲結(jié)合形成紅紫色的絡(luò)合物，此反應(yīng)成為雙縮脲反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子中含有肽鍵與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似，故能發(fā)生此反應(yīng)。因所產(chǎn)生的顏色密度與參與反應(yīng)肽鍵數(shù)成比例，可定性或定量分析蛋白質(zhì)濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm。

Leagene雙縮脲試劑(AB液)由Biuret Reagent A、Biuret Reagent B組成，主要試劑為氫氧化鈉和硫酸銅。如果組織中含有蛋白質(zhì)或具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)，顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，該試劑是較為粗略的驗(yàn)證蛋白質(zhì)存在的方法，多用于定性檢測蛋白質(zhì)。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。